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BD細胞凋亡雙染試劑盒AnnexinV-FITC/PI

  • 更新時間:  2023-07-25
  • 產品型號:  556547
  • 簡單描述
  • BD細胞凋亡雙染試劑盒AnnexinV-FITC/PI
    規格:100T
    英文名:
    AnnexinV-FITC/PI
    *
詳細介紹

BD細胞凋亡雙染試劑盒AnnexinV-FITC/PI
簡單介紹:

 在正常細胞中,***脂酰絲氨酸只分布在細胞膜脂質雙層的內側,細胞發生凋亡zui早期,膜***脂酰絲氨酸(PS)由脂膜內側翻向外側,這一變化早于細胞皺縮、染色質濃縮、DN**斷化和細胞膜的通透性增加等凋亡現象。AnnexinV是一種***脂結合蛋白,與***脂酰絲氨酸有高度親和力,故可通過細胞外側暴露的***脂酰絲氨酸與凋亡早期細胞的胞膜結合。因此AnnexinV被作為檢測細胞早期凋亡的靈敏指標之一。***化丙***(Propidium Iodide,PI)是一種核酸染料,它不能透過完整的細胞膜,但凋亡中晚期的細胞和死細胞由于細胞膜通透性的增加,PI能夠透過細胞膜而使細胞核染紅。因此將Annexin V與PI匹配使用,就可以將處于不同凋亡時期的細胞區分開來。

BD細胞凋亡雙染試劑盒AnnexinV-FITC/PI

組成成分:

Product code Description
556547         Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit I
Components:
556547a      Annexin V Binding Buffer, 10X conc (51-66121E
556547b      Annexin V-FITC (51-65874X)
556547c      Propidium Iodide Staining Solution(51-66211E)

操作步驟:

貼壁細胞需用0.25%的胰酶消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的胰酶消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的胰酶消化收集后(注:胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上***脂酰絲氨酸與Annexin V-FITC的結合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。

大量現貨*!

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